Isi
Escherichia coli, E. coli, adalah bakteri yang tumbuh di usus mamalia yang lebih rendah. Bakteri ini pertama kali ditemukan pada akhir 1800-an. Sejak itu, telah memiliki sejarah panjang dalam penelitian ilmiah. Ini adalah organisme yang paling banyak digunakan dalam genetika molekuler. Bagian dari alasan E. coli yang biasa digunakan dalam penelitian ilmiah adalah mudah tumbuh di laboratorium. Faktor-faktor yang membuat E. coli mudah tumbuh adalah kebutuhan gizinya yang sederhana, laju pertumbuhan yang cepat dan persyaratan pemeliharaan yang moderat.
Sterilkan loop inokulasi dengan menempatkannya ke dalam api pembakar Bunsen. Lewati setengah bagian bawah loop melalui nyala sampai menyala merah.
Biarkan loop menjadi dingin. Anda dapat menyentuhnya ke agar steril di piring untuk memastikannya telah dingin. Jangan letakkan loop di atas meja atau biarkan menyentuh apa pun selain agar steril atau biakan yang diinginkan sekarang setelah disterilkan.
Celupkan lingkaran ke dalam kultur E.coli dan kemudian lepaskan.
Buka pelat agar dan dengan lembut luncurkan lingkaran ke depan dan ke belakang di atas permukaan satu bagian agar-agar. Berhati-hatilah agar tidak menggores agar-agar dengan lingkaran. Agar-agar menyediakan nutrisi yang dibutuhkan E. coli untuk tumbuh.
Tempatkan loop di api kompor Bunsen lagi untuk mensterilkannya. Setelah batang loop mendingin, sentuh ke bagian steril dari plat untuk memastikannya dingin, kemudian geser loop melalui goresan pertama Anda untuk membuat goresan kedua. Coretan kedua ini adalah versi encer dari coretan pertama. Ulangi proses sterilisasi dan meluncur ini sampai beberapa bagian pelat agar-agar telah meluncur. Alasan Anda melakukan ini adalah agar nantinya Anda dapat memilih dari koloni klon tunggal. Ini akan membantu memastikan Anda memiliki setidaknya satu bagian yang memiliki koloni individu - tidak terlalu terkonsentrasi (yang akan memiliki pertumbuhan terlalu banyak, dan tidak memungkinkan Anda untuk memilih dari satu koloni) dan tidak terlalu encer (yang tidak akan memberikan koloni) .
Sterilkan loop dalam nyala api untuk yang terakhir kalinya sebelum sisihkan di area kerja.
Masukkan kembali bagian atas ke piring agar. Balikkan pelat dan letakkan di inkubator yang diatur hingga 37 derajat Celcius (98,6 derajat Fahrenheit). Suhu inkubasi ideal ini menyimulasikan suhu tubuh manusia tempat E. coli berada. Dalam 24 hingga 48 jam, koloni bakteri E. coli yang terlihat akan muncul di lempeng agar.