Cara Mengukur Suhu Optimal untuk Enzim

Posted on
Pengarang: Robert Simon
Tanggal Pembuatan: 20 Juni 2021
Tanggal Pembaruan: 14 Boleh 2024
Anonim
Uji Enzim Amilase : Pengaruh Suhu dan pH terhadap Aktifitas Enzim
Video: Uji Enzim Amilase : Pengaruh Suhu dan pH terhadap Aktifitas Enzim

Enzim adalah protein yang mengkatalisasi (meningkatkan laju) reaksi kimia. Suhu optimal dari sebagian besar enzim, atau suhu di mana enzim-enzim memfasilitasi reaksi terbaik, adalah antara 35 dan 40 derajat Celcius. Peningkatan suhu di dalam jendela ini meningkatkan laju reaksi, karena menggairahkan molekul dan meningkatkan laju di mana enzim / reaktan bertabrakan dan bereaksi untuk menghasilkan produk. Namun, peningkatan suhu terlalu banyak dapat mengubah sifat enzim dan mencegahnya bekerja sama sekali.

Tentukan suhu enzim optimal dengan memanaskan reaksi dengan jumlah yang sangat kecil dan mengambil sampel kecil dari reaksi, untuk menentukan kapan laju maksimum produk yang dihasilkan terjadi.

    Pilih satu metode. Tentukan bagaimana Anda akan mengukur konsentrasi produk Anda di berbagai titik dalam percobaan. Misalnya, Anda dapat mengukur konsentrasi banyak produk menggunakan spektrofotometer dan menghitung konsentrasi dari absorbansi, atau dengan mengukur fluoresensi dan menghitung konsentrasi dari fluoresensi.

    Siapkan percobaan Anda. Tempatkan reaktan dan enzim Anda dalam wadah kecil dengan penutup, seperti botol kilau. Reaksi akan dimulai. Tempatkan botol kilau dalam gelas air suhu ruangan yang lebih besar. Tempatkan gelas kimia di atas piring pemanas. Tempatkan termometer di dalam gelas kimia. Ini memungkinkan Anda untuk mengukur suhu reaksi di berbagai titik.

    Ambil sampel 100 mikroliter dari reaksi pada suhu kamar, sekitar 25 derajat Celcius. Nyalakan pelat pemanas. Pada berbagai suhu antara 30 dan 40 derajat Celcius (30,5, 31, 31,5, dll.) Ambil 100 sampel mikroliter dari reaksi Anda.

    Tentukan konsentrasi produk Anda pada setiap suhu. Ketika suhu naik di atas 40 derajat Celcius, Anda akan melihat penurunan laju di mana substrat diubah menjadi produk, karena enzim didenaturasi. Titik di mana produk diproduksi pada tingkat maksimum adalah titik di mana suhu berada pada titik optimal.