Kromatografi adalah proses yang digunakan dalam sains untuk memisahkan campuran. Prinsip dasar kromatografi adalah bahwa senyawa berbeda dengan ukuran berbeda akan melewati penghalang pada kecepatan yang berbeda. Dalam kromatografi cair tekanan tinggi (HPLC), senyawa disuntikkan melalui kolom manik-manik dengan ukuran berbeda. Senyawa yang lebih kecil melewati kolom lebih cepat dari senyawa yang lebih besar. Jumlah waktu yang dibutuhkan senyawa untuk melewati kolom adalah waktu retensi (RT). Waktu retensi relatif (RRT) adalah perbandingan RT satu senyawa dengan yang lainnya.
Temukan puncak utama pada HPLC out. Puncak utama akan menjadi puncak terbesar dan paling menonjol dalam output.
Baca RT dari puncak utama. Ini bisa dengan membaca dengan melihat kapan puncak dimulai dan kapan berhenti. Jika puncak dimulai pada 6,5 menit dan berakhir pada 9,5 menit, maka RT adalah 3 menit.
Temukan puncak minat. Ini bisa menjadi puncak apa pun yang ingin Anda hitung RRT. Baca RT puncak itu. Jika puncaknya dimulai pada 1 menit dan berakhir pada 2,5 menit, maka RT adalah 1,5 menit.
Bagilah RT puncak minat dengan RT puncak utama untuk menemukan RRT puncak minat. Dalam kasus kami, ini akan menjadi 1,5 menit / 3 menit, atau 0,5.