Isi
Kimiawan sering menggunakan instrumen yang dikenal sebagai spektrometer ultraviolet-terlihat, atau UV-Vis, untuk mengukur jumlah ultraviolet dan radiasi tampak yang diserap oleh senyawa. Jumlah radiasi ultraviolet atau sinar tampak yang diserap oleh suatu senyawa tergantung pada tiga faktor: konsentrasi, c, dari sampel; panjang jalur, l, dari pemegang sampel, yang menentukan jarak di mana sampel dan radiasi berinteraksi; dan koefisien absorpsi molar, e, kadang-kadang disebut sebagai koefisien kepunahan molar. Persamaan ini dinyatakan sebagai A = ecl dan dikenal sebagai hukum Beer. Dengan demikian persamaan tersebut mengandung empat variabel, dan untuk menentukan salah satu dari keempatnya membutuhkan nilai yang diketahui untuk tiga.
Perhitungan
Tentukan absorbansi untuk senyawa pada panjang gelombang yang diinginkan. Informasi ini dapat diekstraksi dari spektrum absorbansi yang dihasilkan oleh instrumen standar UV-Vis. Spektrum biasanya diplot sebagai absorbansi vs panjang gelombang dalam nanometer. Secara umum, penampilan setiap "puncak" dalam spektrum menunjukkan panjang gelombang yang diinginkan.
Hitung konsentrasi sampel dalam mol per liter, mol / L, juga dikenal sebagai molaritas, M. Persamaan umum untuk molaritas adalah
M = (gram sampel) / (berat molekul senyawa) / liter larutan.
Misalnya, sampel yang mengandung 0,10 gram tetraphenylcyclopentadienone, dengan berat molekul 384 gram per mol, dilarutkan dan diencerkan dalam metanol hingga volume akhir 1,00 liter akan menunjukkan molaritas:
M = (0,10 g) / (384 g / mol) / (1,00 L) = 0,00026 mol / L.
Tentukan panjang jalur melalui pemegang sampel. Dalam kebanyakan kasus, ini adalah 1,0 cm. Panjang jalur lain dimungkinkan, terutama ketika berhadapan dengan pemegang sampel yang dimaksudkan untuk sampel gas. Banyak spektroskopi menyertakan panjang jalur dengan informasi sampel pada spektrum absorbansi.
Hitung koefisien absorpsi molar sesuai dengan persamaan A = ecl, di mana A adalah absorbansi, c adalah konsentrasi dalam mol per liter dan l adalah panjang jalur dalam sentimeter. Dipecahkan untuk e, persamaan ini menjadi e = A / (cl). Melanjutkan contoh dari Langkah 2, tetraphenylcyclopentadienone menunjukkan dua maxima dalam spektrum serapannya: 343 nm dan 512 nm. Jika panjang lintasan adalah 1,0 cm dan absorbansi pada 343 adalah 0,89, maka
e (343) = A / (cl) = 0,89 / (0,00026 * 1,0) = 3423
Dan untuk absorbansi 0,35 pada 512 nm,
e (512) = 0.35 / (0.00026 * 1.0) = 1346.