Cara Menghitung Efisiensi Katalitik

Isi

• Dasar-dasar Enzim
• Kinetika Enzim
• Nilai Konstanta
• The Michaelis Constant dan Efisiensi Enzim

Enzim adalah protein dalam sistem biologis yang membantu mempercepat reaksi yang akan berlangsung jauh lebih lambat daripada tanpa bantuan enzim. Karena itu, mereka adalah semacam katalis. Katalis non-biologis lainnya berperan dalam industri dan di tempat lain (misalnya, katalis kimia membantu pembakaran bensin untuk meningkatkan kemampuan mesin bertenaga gas). Namun, enzim unik dalam mekanisme aksi katalitiknya. Mereka bekerja dengan menurunkan energi aktivasi suatu reaksi tanpa mengubah keadaan energi reaktan (input dari reaksi kimia) atau produk (output). Sebaliknya, mereka pada dasarnya menciptakan jalan yang lebih mulus dari reaktan ke produk dengan menurunkan jumlah energi yang perlu "diinvestasikan" untuk menerima "pengembalian" dalam bentuk produk.

Mengingat peran enzim dan fakta bahwa banyak dari protein yang muncul secara alami ini telah dikooptasi untuk penggunaan terapeutik manusia (salah satu contohnya adalah laktase, enzim yang membantu pencernaan gula susu yang gagal dihasilkan jutaan tubuh manusia), tidak mengherankan bahwa ahli biologi telah datang dengan alat formal untuk menilai seberapa baik enzim spesifik melakukan pekerjaan mereka di bawah kondisi yang diketahui - yaitu, menentukan efisiensi katalitiknya.

Dasar-dasar Enzim

Atribut enzim yang penting adalah kekhususannya. Enzim, secara umum, berfungsi untuk mengkatalisasi hanya satu dari ratusan reaksi metabolisme biokimia yang terungkap dalam tubuh manusia setiap saat. Jadi, enzim yang diberikan dapat dianggap sebagai kunci, dan senyawa spesifik tempat kerjanya, yang disebut substrat, dapat disamakan dengan kunci. Bagian dari enzim yang berinteraksi substrat dikenal sebagai situs aktif enzim.

Enzim, seperti semua protein, terdiri dari string panjang asam amino, yang ada sekitar 20 dalam sistem manusia. Situs aktif enzim karena itu biasanya terdiri dari residu asam amino, atau potongan kimia asam amino tertentu yang tidak lengkap, yang mungkin "hilang" proton atau atom lain dan membawa muatan listrik bersih sebagai hasilnya.

Enzim, secara kritis, tidak berubah dalam reaksi yang dikatalisasi - paling tidak setelah reaksi berakhir. Tetapi mereka memang mengalami perubahan sementara selama reaksi itu sendiri, suatu fungsi yang diperlukan dalam memungkinkan reaksi yang ada untuk melanjutkan. Untuk membawa analogi kunci-dan-kunci lebih lanjut, ketika substrat "menemukan" enzim yang diperlukan untuk reaksi yang diberikan dan mengikat ke situs aktif enzim ("penyisipan kunci"), kompleks substrat enzim-mengalami perubahan ("pergantian kunci"). ") yang menghasilkan pelepasan produk yang baru dibentuk.

Kinetika Enzim

Interaksi substrat, enzim, dan produk dalam reaksi yang diberikan dapat direpresentasikan sebagai berikut:

E + S ⇌ ES → E + P

Sini, E mewakili enzim, S adalah media, dan P adalah produk. Dengan demikian, Anda dapat membayangkan proses ini secara longgar mirip dengan segumpal tanah liat pemodelan (S) menjadi mangkuk yang sepenuhnya terbentuk (P) di bawah pengaruh pengrajin manusia (E). Tangan pengrajin dapat dianggap sebagai situs aktif "enzim" yang diwujudkan oleh orang ini. Ketika gumpalan tanah liat menjadi "terikat" ke tangan orang-orang, mereka membentuk "kompleks" untuk sementara waktu, di mana tanah liat itu dibentuk menjadi bentuk yang berbeda dan ditentukan oleh tindakan tangan yang digabungkan (ES). Kemudian, ketika mangkuk sudah berbentuk penuh dan tidak ada pekerjaan lebih lanjut diperlukan, tangan (E) lepaskan mangkuk (P), dan prosesnya selesai.

Sekarang perhatikan panah pada diagram di atas. Anda akan melihat bahwa langkah antara E + S dan ES memiliki panah yang bergerak di kedua arah, menyiratkan bahwa, seperti halnya enzim dan substrat dapat mengikat bersama untuk membentuk kompleks enzim-substrat, kompleks ini dapat memisahkan ke arah lain untuk melepaskan enzim dan substratnya dalam bentuk aslinya.

Panah searah antara ES dan P, di sisi lain, menunjukkan produk itu P tidak pernah secara spontan bergabung dengan enzim yang bertanggung jawab atas penciptaannya. Ini masuk akal mengingat spesifisitas enzim yang dicatat sebelumnya: Jika suatu enzim berikatan dengan substrat yang diberikan, maka itu juga tidak mengikat pada produk yang dihasilkan atau kalau tidak maka enzim akan spesifik untuk dua substrat dan karenanya tidak spesifik sama sekali. Juga, dari sudut pandang akal sehat, tidak masuk akal bagi enzim tertentu untuk membuat reaksi yang diberikan bekerja lebih baik di kedua arah; ini akan seperti mobil yang berputar dengan menanjak dan menurun dengan mudah.

Nilai Konstanta

Pikirkan reaksi umum pada bagian sebelumnya sebagai jumlah dari tiga reaksi yang berbeda, yaitu:

1) ; E + S → ES 2) ; ES → E + S 3) ; ES → E + P

Masing-masing reaksi individu memiliki konstanta laju sendiri, ukuran seberapa cepat reaksi yang diberikan berlangsung. Konstanta ini khusus untuk reaksi tertentu dan telah ditentukan secara eksperimental dan diverifikasi untuk sejumlah besar substrat-plus-enzim yang berbeda dan pengelompokan kompleks-plus-produk enzim-substrat. Mereka dapat ditulis dalam berbagai cara, tetapi umumnya, tetapan laju untuk reaksi 1) di atas dinyatakan sebagai k₁, yang dari 2) sebagai k_-1, dan 3) sebagai k₂ (ini terkadang ditulis k_kucing).

The Michaelis Constant dan Efisiensi Enzim

Tanpa menyelam ke dalam kalkulus yang diperlukan untuk mendapatkan beberapa persamaan yang mengikuti, Anda mungkin dapat melihat bahwa kecepatan di mana produk menumpuk, v, adalah fungsi dari konstanta laju reaksi ini, k₂, dan konsentrasi ES hadir, dinyatakan sebagai. Semakin tinggi konstanta laju dan semakin kompleks hadir enzim-substrat, semakin cepat produk akhir dari reaksi terakumulasi. Karena itu:

v = k_2

Namun, ingat bahwa dua reaksi lain selain yang menciptakan produk P terjadi pada saat yang bersamaan. Salah satunya adalah pembentukan ES dari komponennya E dan S, sedangkan yang lainnya adalah reaksi yang sama secara terbalik. Mengambil semua informasi ini bersama-sama, dan memahami bahwa tingkat pembentukan ES Anda harus menyamakan tingkat penghilangannya (dengan dua proses yang berlawanan), yang Anda miliki

k_1 = k_2 + k _ {- 1}

Membagi kedua istilah dengan k₁ hasil panen

= {(k_2 + k _ {- 1}) di atas {1pt} k_1}

Karena semua "k"Istilah dalam persamaan ini adalah konstanta, mereka dapat digabungkan menjadi konstanta tunggal, K_M.:

K_M = {(k_2 + k _ {- 1}) di atas {1pt} k_1}

Ini memungkinkan persamaan di atas ditulis

= K_M

K_M. dikenal sebagai konstanta Michaelis. Ini dapat dianggap sebagai ukuran seberapa cepat kompleks enzim-substrat menghilang melalui kombinasi menjadi tidak terikat dan produk baru terbentuk.

Kembali ke persamaan untuk kecepatan pembentukan produk, v = k₂, substitusi memberi:

v = Bigg ({k_2 di atas {1pt} K_M} Bigg)

Ekspresi dalam tanda kurung, k₂/K_M., dikenal sebagai konstanta spesifisitas _, _ juga disebut efisiensi kinetik. Setelah semua aljabar sial ini, Anda akhirnya memiliki ekspresi yang menilai efisiensi katalitik, atau efisiensi enzim, dari reaksi yang diberikan. Anda dapat menghitung konstanta langsung dari konsentrasi enzim, konsentrasi substrat dan kecepatan pembentukan produk dengan mengatur ulang untuk:

Bigg ({k_2 di atas {1pt} K_M} Bigg) = {v di atas {1pt}}