Isi
- Visualisasi yang lebih baik
- Identifikasi dan Klasifikasi
- Deteksi Viabilitas
- Identifikasi Struktur Seluler
Ahli mikrobiologi mempelajari karakteristik mikroorganisme seperti alga, protozoa, bakteri, jamur dan virus menggunakan mikroskop. Sementara beberapa organisme seperti protozoa dan sel ragi mudah diamati dengan menggunakan tunggangan basah, sel bakteri membutuhkan pewarnaan. Para ilmuwan mengembangkan beberapa metode seperti pewarnaan Gram, pewarnaan asam-cepat dan pewarnaan fluoresen untuk visualisasi yang lebih baik dari sel bakteri dan struktur sel. Dengan menggunakan metode pewarnaan seperti itu, dimungkinkan untuk mengidentifikasi fitur struktural yang membantu mengklasifikasikan bakteri.
Visualisasi yang lebih baik
Organisme bakteri sangat kecil sehingga kebanyakan hanya terlihat di bawah mikroskop dengan kekuatan perbesaran 1000X. Namun, hanya perbesaran ukuran tidak memberikan tingkat kejelasan yang cukup, sehingga bakteri harus diwarnai sebelum pengamatan untuk memberikan kejelasan yang diperlukan untuk visualisasi.
Identifikasi dan Klasifikasi
Bakteri pewarnaan untuk membedakan antara jenis bakteri dikenal sebagai pewarnaan diferensial. Pewarnaan Gram adalah salah satu pewarnaan diferensial yang membedakan antara bakteri berdasarkan kandungan dinding selnya. Dalam metode ini, sel-sel bakteri bereaksi dengan pewarnaan kristal violet untuk mengambil warna violet. Pada menambahkan zat penghilang noda, beberapa sel bakteri kehilangan warna sedangkan yang lain tidak. Pada menambahkan pewarnaan safranin, sel-sel yang tidak berwarna mengambil noda untuk tampak merah sementara sel-sel bakteri yang tidak kehilangan warna tetap ungu. Sel-sel bakteri yang mengambil warna merah disebut organisme Gram negatif dan mereka yang tidak mengambil warna diklasifikasikan sebagai organisme Gram positif. Pewarnaan gram menyediakan metode cepat untuk identifikasi awal bakteri yang terlibat dalam infeksi. Demikian pula, prosedur pewarnaan cepat asam membantu mengidentifikasi secara spesifik organisme yang termasuk dalam kelas bakteri yang disebut Mycobacteria, seperti Mycobacterium tuberculosis.
Deteksi Viabilitas
Dalam spesimen kultur bakteri, seringkali penting untuk mendeteksi keberadaan sel bakteri hidup. Metode pewarnaan seperti pewarnaan fluoresen membantu mengidentifikasi apakah sel biakan layak atau tidak. Bakteri hidup memiliki kemampuan untuk mengubah pewarnaan Tetrazolium Chloride (CTC) 5-Cyano-2,3-ditolyl menjadi pewarna yang menunjukkan fluoresensi merah. Oleh karena itu, ketika kultur diwarnai dengan CTC memancarkan fluoresensi seperti itu, itu menunjukkan adanya bakteri yang layak. Propidium iodida adalah noda yang hanya bekerja pada sel tidak hidup yang memiliki membran yang rusak, dan karenanya, berguna dalam mengidentifikasi sel bakteri yang mati.
Identifikasi Struktur Seluler
Pewarnaan menyediakan metode memvisualisasikan beberapa struktur seluler dengan jelas. Misalnya, metode pewarnaan Fuelgen memungkinkan identifikasi inti dalam sel bakteri sedangkan pewarnaan Albert berguna dalam memvisualisasikan butiran metakromatik. Demikian pula, teknik impregnasi perak memungkinkan identifikasi spirochetes. Flagella mudah diamati ketika diwarnai dengan noda Ryu. Pewarnaan hijau perunggu membantu mengidentifikasi spora bakteri.