Lima Langkah untuk Mempersiapkan Agar Agar

Posted on
Pengarang: Louise Ward
Tanggal Pembuatan: 8 Februari 2021
Tanggal Pembaruan: 22 November 2024
Anonim
Media Prep
Video: Media Prep

Agar adalah zat seperti agar-agar yang berasal dari dinding sel ganggang merah yang dimurnikan.Ini ditambahkan ke media mikrobiologis, yang merupakan bahan di mana mikroorganisme ditanam di laboratorium, agar memberikan lebih banyak struktur padat pada zat tersebut. Agar tidak memiliki nilai gizi, jadi ketika para ilmuwan menggunakannya untuk membiakkan mikroorganisme, mereka menambahkan berbagai nutrisi untuk meningkatkan pertumbuhan bakteri dalam cawan petri atau tabung reaksi. Ketika para peneliti menyimpan bakteri dalam tabung reaksi, itu disebut sebagai agar agar karena media pertumbuhan cair mengeras saat tabung berada dalam posisi miring. Penutup atas sekrup pada slant mencegah agar agar tidak mengering.

    Media disiapkan berbeda untuk miring daripada cawan petri. Sterilisasi dilakukan dengan agar-agar di dalam tabung; cawan petri sudah disterilkan sebelum agar-agar yang sudah disterilkan dituangkan ke dalamnya. Ukur jumlah air yang dibutuhkan dan masukkan ke dalam labu Erlenmeyer. Panaskan di atas kompor sampai hampir mendidih. Tambahkan bahan lain jika perlu dan aduk campuran perlahan dan terus-menerus sampai larut. Bahan-bahan ini mungkin termasuk ekstrak daging sapi, pepton, dan buffer pH, tergantung pada jenis mikroorganisme yang dibudidayakan.

    Sebelum menambahkan bubuk agar-agar kering, campur dengan sedikit air suling dingin untuk mencegah lumping. Berhati-hatilah saat menambahkan agar ke dalam cairan panas karena bisa membuih dan meluap-luap. Tambahkan agar-agar dalam jumlah sedikit sekaligus dan aduk agar merata agar-agar. Matikan api saat campuran mulai menguap, sebelum mendidih.

    Tempatkan tabung reaksi yang tidak tertutup di rak tabung reaksi. Isi tabung reaksi dengan mentransfer sekitar 5 mililiter - sekitar 0,17 ons atau 1 sendok teh - agar cair dari panci menggunakan pipet steril. Tutup setiap tabung reaksi secara longgar, karena agar tidak akan disterilkan jika ditutup rapat. Sterilkan semua tabung dalam autoklaf selama sekitar 25 menit pada 121 derajat Celcius, atau 250 derajat Fahrenheit.

    Saat agar masih panas, miringkan rak yang memegang tabung reaksi dengan hati-hati pada permukaan yang padat atau buku tebal, pastikan media di dalam tabung berada pada posisi miring relatif terhadap tabung reaksi. Biarkan media menjadi dingin dan mengeras pada sudut ini, yang meningkatkan area permukaan agar-agar. Kencangkan tutup tabung reaksi setelah agar telah dingin. Miring siap digunakan setelah agar-agar membeku. Mereka dapat disimpan pada suhu kamar atau di lemari es untuk digunakan di masa depan.

    Inokulasikan slant dengan mentransfer sel dengan loop inokulasi dari mikroorganisme koloni tunggal di piring ke permukaan slant. Gerakkan loop melewati permukaan slant dan rekap tabung. Inkubasi miring sampai ada bukti pertumbuhan, lalu masukkan tabung ke dalam kulkas.